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想檢測實驗樣本中的靶蛋白，但是ELISA、WB、IHC傻傻分不清，到底應該選擇哪種方法呢？又該如何開展實驗呢？

本文幫大家總結整理了ELISA、WB、IHC的標準實驗流程，幫大家順利搞定實驗！

酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）、蛋白免疫印跡（WB）、免疫組化（IHC），是免疫學三大常用工具，應用于目的蛋白的定量、定性和定位分析。

這三種免疫學檢測手段，都是基于抗原與抗體特異性結合的原理，其差異性在于：

◆ ELISA更適合定量檢測胞外的分泌性蛋白

◆ WB多用于胞膜、胞漿或胞核蛋白的半定量檢測

◆ IHC主要用于胞蛋白的定位

下面分為為大家介紹三大實驗

蛋白免疫印跡（WB）

WB(Western Blot，蛋白免疫印跡)利用靶蛋白分子量大小不同的原理，用SDS-PAGE（凝膠電泳）分離蛋白質(zhì)，將分離開的蛋白質(zhì)用電轉(zhuǎn)儀轉(zhuǎn)移到固相載體（膜）上，然后利用抗原-抗體-標記物顯色來檢測目標蛋白含量。WB多用于胞膜、胞漿或胞核蛋白的定性和半定量檢測。

免疫組化（IHC）

IHC(Immunohistochemistry，免疫組織化學技術)融合了免疫學原理（抗原抗體特異性結合）和組織學技術（組織的取材、固定、包埋、切片、脫蠟、水化等），通過化學反應，使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色，來對組織（細胞）內(nèi)抗原進行定位、定性及定量的研究，其主要對胞內(nèi)蛋白進行定位。

酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）

ELISA運用了免疫學原理和化學反應顯色原理，需要將抗原或抗體預包被在固相載體表面，使后來形成的抗原-抗體-酶（熒光基團）-底物復合物黏附在載體上，通過檢測OD值或發(fā)光值，來檢測靶蛋白的含量。ELISA更適合定量檢測胞外的分泌性蛋白。

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